Hodja Akhmet Yassawi 7. International Congress on Scientific Research, Mingachevir, Azerbaycan, 24 - 25 Şubat 2023, ss.168-178
ÖZET
Bu çalışmada anabilim dalı kültür koleksiyonunda bulunan
subklinik mastitisli sığırsütlerinden izole edilen 140 adet stafilokok
izolatından Staphylococcus aureus
izolatlarınınmoleküler identifikasyonu ve bazı önemli virülens genlerinin
tespiti amaçlandı. Bu amaçla 140 stafilokok izolatı termonükleaz (nuc) gen varlığı yönünden PZR ile
incelendi. nuc geni (279 bp) tespit
edilen 42 izolat S. aureus olarak
identifiye edildi. Ayrıca izolatlarda lökotoksin geni (pvl), stafilokokal klasik enterotoksin genleri (sea, seb,
sec), eksfolyatif toksin genleri (eta, etb),
hemolizin genleri (hla, hlb), adezin faktör genleri (fnbA, fnbB, clfa) ve toksik şok
sendrom toksin geni (tst) olmak üzere
12 farklı virülens geninin varlığı 3 farklı multipleks PZR kullanılarak
araştırıldı. İzolatların 30 (%71.4)’u clfa,
24 (%57.1)’ü hla, 14 (%33.3)’ü hlb, 10 (%23.8)’u fnbB, 6 (%14.2)’sıfnbA, 6
(%14.2)’sıetb, 5 (%11.9)’i sec, 5 (%11.9)’i tst, 3 (%7.1)’ü sea, 2
(%4.7)’si pvl ve 1 (%2.3)’i eta geni açısından pozitif bulundu.
İzolatların hiçbirinde seb geni
saptanamadı. İzolatların 38’inde bir ya da daha fazla virülens geni, 29’unda ise
iki ya da daha fazla virülens geni belirlendi. 4 izolatta ise incelenen
virülens genlerin hiçbiri saptanamadı. İncelenen izolatlarda en fazla tespit
edilen virülens genlerin clfa ve hla olduğu görüldü. Sonuç olarak sınırlı
dahi olsa sığır mastitislerinin patogenezinde rol oynayan virülens gen
patternleri ortaya konuldu. Çalışma sonuçlarının sığır mastitislerinin
etiyolojisinde önemli rol oynayan S.
aureus’a ait virülens faktörlerinin karakterizasyon çalışmalarına katkı
sağlayacağı kanaatine varıldı.
Anahtar Kelimeler: Mastitis,
Sığır, S. aureus, Virülens gen
profili
ABSTRACT
This study aimed to determine the molecular identification of
Staphylococcus aureus isolates and
some important virulence genes from 140 staphylococci samples isolated from cow
milk with mastitis in the culture collection of the department. For this
purpose, the presence of the thermonuclease
(nuc) gene in 140 S. aureus isolates was examined by PCR.
Forty-two isolatest that were positive for the nuc gene (279 bp) were identified as S. aureus. In addition, the isolates were examined for the presence
of 12 different virulence genes, including leukotoxin gene (pvl), staphylococcal classical
enterotoxin genes (sea, seb, sec),
exfoliative toxin genes (eta, etb), hemolysin genes (hla, hlb),
adhesin factor genes (fnbA, fnbB, clfa), and toxic shock syndrome toxin gene (tst), using three different multiplex PCR. Of the isolates were
found to be positive 30 (71.4%) for clfa,
24 (57.1%) hla, 14 (33.3%) hlb, 10 (23.8%) fnbB, 6 (14.2%) fnbA, 6
(14.2%) etb, 5 (11.9%) sec, 5 (11.9%) tst, 3 (7.1%) sea, 2
(4.7%) pvl, and 1(2.3%) eta genes. The seb gene was not detected in any of the isolates. At the same time
one or more virulence genes were determined in 38 of 42 isolates, two or more
virulence genes in 29 of the isolates. None of the virulence genes examined in
4 isolates could be detected. It was seen that the most detected virulence
genes in the analyzed isolates were clfa
and hla. As a result, virulence gene
patterns that play a role in the pathogenesis of bovine mastitis, even if
limited, were revealed. It was concluded that the results would contribute to
the characterization studies of virulence factors belonging to S. aureus, which play an important role
in the etiology of bovine mastitis.
Keywords: Bovine,
Mastitis, S.aureus, Virulence gene
profile.